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哪種類型的抗體適合我?

更新時間:2024-01-22      點擊次數(shù):651

對于大多數(shù)實驗室來說,正確的決定取決于科學和成本的某種結(jié)合。需要考慮的一些問題是:

您需要多少材料以及需要多長時間?

早期探索型項目可能只需要有限數(shù)量的材料,或者您的工作流程可能一次僅使用幾微克的抗體。利用多克隆生成對于這些情況非常有效。兔子是多克隆抗體的行業(yè)標準,因為它具有強大的免疫系統(tǒng),并且可以根據(jù)需要靈活地一次生產(chǎn)多年的抗體。如果您需要預先大量的材料而不是長期使用,那么對較大的動物(例如山羊)進行免疫可能會有所幫助。 

然而,如果您正在嘗試生產(chǎn)用于有可能無限期使用的檢測的試劑,那么單克隆生產(chǎn)可能更理想。

抗體的活性是否必須始終相同,或者某些批次間的差異在您的系統(tǒng)中是否可行?

通過多克隆生產(chǎn),動物得到免疫,您的測試物品就成為最終收集到的一切。隨著時間的推移,反應(yīng)可能會發(fā)生變化或成熟,但可以通過在檢測中使用一致量的抗體來減輕這種情況。 

同時,單克隆生產(chǎn)的明確目的是執(zhí)行多個篩選步驟,以找到表達適合您的檢測反應(yīng)的抗體的單個細胞系。只要能夠保持穩(wěn)定性,該細胞系就應(yīng)該能夠在您需要時表達抗體。最終一致性的最終保證是對抗體的可變區(qū)進行測序并將其生產(chǎn)為重組蛋白。 

該項目有時間限制嗎?

多克隆項目平均需要三個月的時間,而分離出具有所需性能的特定單克隆細胞系可能需要六個月的時間。此后生產(chǎn)重組蛋白形式的抗體可能還需要三個月或更長時間。 

您是否已經(jīng)擁有希望與新生成的材料并行使用的現(xiàn)有抗體?

無論您當前擁有的抗體是多克隆還是單克隆,請選擇不同的物種來開發(fā)第二抗體。這樣您就可以用單獨的二抗進行探測并同時查看兩種反應(yīng)性。例如,在雞、山羊或豚鼠中制備多克隆是最常選擇與現(xiàn)有兔抗體并行使用的選項。 

您的預算是多少?

由于固有的成本效益(平均單克隆成本約為平均多克隆成本的六倍),同時多種抗體的高通量需求很可能會利用多克隆生產(chǎn)。然而,對于早期診斷或治療,以單克隆項目開始可能會更好地滿足您的整體需求,并在項目加速方面帶來紅利。


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