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選購胎牛血清的常見問題和注意事項

更新時間:2023-09-05      點擊次數(shù):789

Q: 應該如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質量受損? A:  建議 血清應保存在-10℃及以下。若一次無法用完一瓶,無菌分裝血 清至恰當?shù)臏缇萜鲀龋俜呕乩鋬?。解凍時,建議將血清從冷 凍室先移至2-8℃冰箱解凍,再放置于室溫進行解凍。請注 意,解凍過程中需要經(jīng)常搖晃混合。嚴禁將FBS 37℃長時間孵 育解凍。

 

Q: 培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,可長期保存嗎? A: 一旦 您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時,您應該在2周內使用它。

 

Q:  如果我的FBS到達時已經(jīng)部分解凍,還能使用嗎? A:  所有的 依科賽生物ExCell Bio血清都在冰凍狀態(tài)下由干冰運輸,因此您  收到時應該仍是冰凍狀態(tài)。如果只是部分解凍, FBS仍然可以使 用,但是建議先將FBS在冰箱中充分解凍,之后溫和的搖晃搖勻,

再移至-10℃及以下進行儲存。

 

Q: 不同批次血清顏色為什么有差異? A:  血清中含有微量的血 紅蛋白,與采集血液過程中血細胞的破裂數(shù)目有關,只要血紅蛋 白的含量在藥典規(guī)定范圍內,顏色的深淺和血清品質無關,不影

響細胞培養(yǎng)。中國藥典規(guī)定血紅蛋白含量≤200mg/L。

 

Q:  熱滅活是必須的嗎?A:  實驗顯示,熱滅活對大多數(shù)的細胞 而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促 進,或全沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的 質量,而造成細胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱滅活的血清,會增 加沉淀產(chǎn)生的概率,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小 黑點",常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染。熱滅活過程中 局部溫度過高,搖晃不均勻,滅活時間過長,都會造成血清品質 下降。若非必須,可以不需要做熱滅活這一步。不但節(jié)省時間,更確保血清的質量!


 Q: 血清使用前是否有必要熱滅活,如何熱滅活? A:  請先確認 細胞培養(yǎng)實驗方案是否需要對血清進行熱滅活。 一般不建議熱滅 活,熱滅活處理會損失血清中部分營養(yǎng)成分,并且容易發(fā)生蛋白 質聚集沉淀;少數(shù)對補體敏感的實驗需要(如某些免疫學實驗,

腺病毒包裝,某些PS培養(yǎng)等),可酌情使用熱滅活血清。熱滅活方法:血清全解凍充分搖勻后置于56°水浴中30分鐘

Q:  細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理? A:  一旦您在細 胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否 渾濁,然后在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài),黑點是否游動。如 果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變 渾濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細胞,生長狀態(tài)良好,與黑點出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,

黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關:①細胞生長過老,破碎的 細胞殘?。?/span>②配制培養(yǎng)基的pH 值偏高,不宜細胞生長;③培養(yǎng) 原代細胞中出現(xiàn)小黑點,可能是原代組織中的雜質,多次傳代可以消除;④血清等級不足以維持細胞良好的生長。

 

Q:FBS 中含有的絮狀物是什么東西? A:FBS  中的絮狀物可能由 很多種原因造成,其中最常見的沉淀主要成分是纖維蛋白和脂蛋 白,不會影響血清品質,沉淀若需去除,視沉淀大小500-1000×g,離心5-10min去除,也可不做處理。

 

Q: 為什么要使用正規(guī)進口的血清? A:① 有的血清缺乏檢驗檢 疫監(jiān)管,冷鏈運輸無法保障,嚴重影響血清批內和批間穩(wěn)定性, 實驗數(shù)據(jù)結果不可控;②正規(guī)的血清來源于中華人民共和國海關 總署允許進口的非疫區(qū)國家,防止未經(jīng)檢疫的血液制品中可能攜帶傳染性物質, 一旦流入境內,可能會對試者和研究人員的生命健康造成威脅。


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